رنگ آمیزی گرم

رنگ آمیزی گرم

رنگ آمیزی گرم ابتدایی‌ترین، قدیمی‌ترین و ساده‌ترین روش‌ تقسیم‌بندی و تفکیک باکتری‌ها از یکدیگر نوعی می‌باشد که ابتدا توسط فردی به نام «گِرَم» به کار گیری شد.
این روش بر مبنای ساختار دیواره‌ی باکتری‌ها آن‌ها را به دو رنگ صورتی و بنفش در می‌آورد.
باکتری‌هایی که به رنگ بنفش در می‌آیند «گرم مثبت»
باکتری‌هایی که به رنگ صورتی در می‌آیند «گرم منفی»

📎مواد و وسایل کار:

#لام برای تهیه‌ی گسترش میکروبی.
#آب‌مقطر و آب‌پاش (پیسِت) برای شست‌وشو.
#شعله برای تثبیت گسترش میکروبی.
#کریستال_ویوله (رنگ بنفش).
#سافرانین (رنگ صورتی).
#الکل برای رنگ‌بری.
#لوگل برای تثبیت رنگ.
#لوپ برای برداشتن باکتری.

🔍روش رنگ آمیزی گرم:

یک قطره‌ی کوچک آب مقطر وسط یک لام تمیز بگذارید.
مقدار کمی باکتری، با لوپی که از شعله عبور داده شده است، برداشته و در قطره بگذارید.
با همان لوپ در حالی که قطره را گسترش می‌دهید، باکتری‌ها را در قطره پخش کنید، به طوری که قطره به طور یک‌نواختی کدر شود.
بگذارید گسترش میکروبی شما کاملاً خشک شود. آن را چند بار از روی شعله عبور دهید تا باکتری‌ها به لام بچسبند (تثبیت شوند).
#کلاس را به خاطر بسپارید.
ک: کریستال ویوله
ل: لوگل
ا: الکل
س: سافرانین

با حفظ ترتیب و زمان (برای هر مرحله یک دقیقه اما برای الکل ۳۰ تا ۴۰ ثانیه) مواد را با قطره چکان روی گسترش بریزید.
پس از هر مرحله شستشو با آب مقطر نیاز است.

در آخر لام را در محلی قرار دهید تا خشک شود.
بعد با عدسی ۱۰۰ برابر میکروسکوپ نوری مشاهده کنید.🔬

مکانیسم رنگ آمیزی گرم:

باکتری‌های گرم مثبت دیواره‌ی نفوذ ناپذیرتری نسبت به گرم منفی‌ها دارند.
در واقع لایه‌ی پپتیدوگلیکانی که بخش عمده‌ی دیواره‌ی باکتری‌ها را می‌سازد در گرم مثبت‌ها ضخیم‌تر است. در حالی‌که در باکتری‌های گرم منفی دیواره‌ی نازک با غشاء اضافی دیگری از جنس لیپید به نام غشاء خارجی پوشانده شده است. کریستال ویوله از دیواره‌ی هر دو باکتری عبور می‌کند و به مولکول‌های خاصی متصل می‌شود. لوگل با آن ترکیب شده و رسوب‌های درشتی ایجاد می‌کند که رنگ را تثبیت می‌کند. در باکتری‌های گرم منفی، با افزودن الکل، چربی‌های سطحی باکتری شسته شده و منافذ دیواره باز می‌شوند و رسوب از سلول‌های باکتری خارج می‌شود. پس از رنگ‌آمیزی با سافرانین، گرم منفی‌ها که بی‌رنگ بودند به رنگ صورتی دیده می‌شوند. اما گرم مثبت‌ها که پیشتر رنگ بنفش را به خود جذب کرده‌اند با وجود دارا بودن ذرات رنگ قرمز، باز هم به رنگ بنفش دیده می‌شوند.🤓

📄گردآورنده: الهام بختیاری

📌منبع: باکتری شناسی پایه دکتر قانع و دکتر بابایی خو
‌