فهرست مطالب
هدف آزمایش سالکوفسکی :
تشخیص کلسترول در نمونه مورد نیاز
مقدمه ای در مورد آزمایش سالکوفسکی :
لیپیدها بیومولکول هایی هستند که در تمامی سلول ها یافت می شوند.
این ترکیبات علاوه بر اینکه باعث ذخیره انرژی در سلول می شوند، در ساختمان غشای سلولی نیز به کار می روند و تجمع آن ها در زیر پوست، یک لایه محافظتی در برابر ضربه و حرارت به وجود می آورد. این بیومولکول ها دارای حلالیت بسیار کمی در آب هستند اما در حلال های آلی مانند کلروفرم ، اتر، بنزن و… به خوبی حل می شوند. برای این که بتوان کلسترول را در نمونه های مختلف تشخیص داد ،
آزمایش های گوناگونی وجود دارد که یکی از این آزمایش ها، آزمایش سالکوفسکی است.
اساس کار آزمایش salkowski به چه صورت می باشد :
برای انجام این آزمایش ابتدا در یک لوله به مقدار یک سی سی کلسترول کلروفرم می ریزند و در لوله دیگر به همان اندازه محلول کلروفرم 1% می ریزیم. و بر روی هر کدام از محلول ها ، مقدار یک سی سی اسید سولفوریک غلیظ را به آرامی و به صورت مایل می ریزند. پس از چند لحظه مشاهده می شود که در لوله ای که حاوی کلسترول کلروفرم بوده است ، تغییر رنگ ایجاد شده و یک محلول دو فازی ایجاد می شود.
در دو فاز ایجاد شده در آزمایش salkowski ، کدامیک اسید سولفوریک و کدامیک کلروفرم است ؟
در کلروفرم به دلیل داشتن سه اتم کلر، چگالی زیادی دارد و بسیار سنگین تر از فاز آبی می باشد.
سولفوریک اسید به تنهایی چگالی بیشتری نسبت به کلروفرم دارد اما چون از آن به تنهایی استفاده نمی شود و باید از قبل آنرا با آب رقیق کرد. از این رو جا به جایی فاز به غلظت فاز اسیدی بستگی دارد اما چون در این آزمایش معمولا اسید بسیار رقیق می شود، فاز کلروفرم در مقایسه با آن سنگین تر بوده و در زیر قرار می گیرد.
نتیجه آزمایش و تشخیص کلسترول :
هنگامی که اسید سولفوریک را به محلول کلسترول کلروفرم اضافه می کنیم ، SO4 به COOH کلسترول می چسبد و در قسمت کلروفرم محلولی قرمز رنگ به وجود می آید اما در لوله دیگر که حاوی کلروفرم خالص است، هیچ تغییر رنگی مشاهده نمی شود.
نویسنده : مریم درخشانیان
